基因工程试卷
篇一：基因工程测试题
基因工程测试题
一、选择题：
1.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是()
A.大肠杆菌B.酵母菌
C.肺炎双球菌 D.乳酸菌
2.下列有关基因工程的叙述，正确的是()
A．DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来
B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变
C．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大
D．常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等
3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是()
A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体
B.重组DNA分子中替换一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染
D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
4.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(ka)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养
基上生长。下列叙述正确的是
()
A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶
B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株
C.卡那霉素抗性基因(ka)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点
D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是()
A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物
B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因
C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有
D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白
6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是()
A.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质
B.蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成
C.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成
D.基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
7.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是()
A．人工合成基因
B．制备重组DNA分子
C．把目的基因导入受体细胞
D．目的基因的检测和表达
8.已知一双链DNA分子，用限制酶Ⅰ切割得到长度为120 kb(kb：千碱基对)片段；用限制酶Ⅱ切割得到40 kb和80 kb两个片段；同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时，得到10 kb、80 kb和30 kb 3个片段，据此分析该双链DNA分子结构及酶切位点情况为
()
9．据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是()
A．限制性核酸内切酶可以切断a处，DNA连接酶可以连接a处
B．DNA聚合酶可以连接a处
C．解旋酶可以使b处解开
D．连接c处的酶可以为DNA连接酶
10.采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是()
A．如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因
B．人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则
C．在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中
D．人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
11.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生
长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是()
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．转基因小鼠的肝细胞含有人的生长激素基因
12．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是 ()
A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶
C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
篇二：基因工程试卷及答案 (1)
一、 名词解释
1、 基因治疗：是将目的基因放进特定载体中导入靶细胞或组织，通过替换或补偿引起疾病的基因，或者关闭或抑
制异常表达的基因来克服疾病的治疗方法。
2、 反义核酸：是指能与特定mRNA精确互补、特异阻断其翻译的RNA或DNA分子。
3、 反义DNA：也称反义寡核苷酸或反义脱氧寡核苷酸，是一种人工合成的、能与mRNA互补的、用于抑制翻译的
短小反义核酸分子。
4、 同尾酶：指切割DNA可产生相同的黏性末端的限制酶
5、 转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得
细胞DNA的过程。
6、 ａ-互补：指E.coli-半乳糖苷酶的两个无活性片段组合而成为功能完整的酶的过程。
7、 转化：指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。
8、 基因克隆：通过体外重组技术，将一段目的DNA经切割、连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量
子代分子的过程。
9、 核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，具有核苷酸水解活性，可特异性剪切RNA分子，相当于RNA酶。
10、位点偏爱：某些限制酶对同一底物中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一识别序列表现出不同的切割效率，这种现象称作为位点偏爱。
二、选择
1.在( B )诱导下，目的蛋白与lacZ就会以融合蛋白的形式表达出来。
A. dNTP B.IPTA C. DMSOD.SDS
2.（ A ）可使表达蛋白避免被细胞内蛋白降解，或使表达的蛋白正确折叠，从而达到维护目的蛋白的目的。
A.分泌表达载体 B.GST融合表达载体 C. 组氨酸标签表达载体D.内含肽表达载体
3.DNA的琼脂糖凝胶电泳方向为（ B ）
A. 正极向负极 B. 负极向正极 C浓度高向浓度低. D. 浓度低向浓度高
4.影响脉冲场凝胶电泳电泳分辨率的最关键因素是（D ）
A.电场强度 B. 缓冲液浓度C. 温度D.脉冲时间
5.控制潜在RNA酶活性最重要的是（C）
A.使用RNA酶抑制剂 B.实验用具C.细致谨慎的操作 D.温度控制
6.酵母基因表达系统的宿主不具有以下哪一条件(B )
A.安全无毒 B.载体DNA转化频率低C. 发酵周期短D.蛋白质分泌能力好
7. 酿酒酵母的附加体形表达载体有（D）的缺点
A.蛋白分泌能力差 B.无终止子 C.不能独立复制 D.无选择压力时不稳定
8.（C）不能用大肠杆菌表达系统来生产。
A.胰岛素 B. 干扰素 C.EPOD.赛若金
9.中国学者从人脐血白细胞中获得的（B）基因已用于我国第一个基因工程干扰素的生产。
A.胰岛素 B. 干扰素ａ-1bC.EPOD.CHO
10.下列哪项不属于反义核酸药物(D )
A.反义DNA B. 核酶C.肽核酸 D.siRNA
答案：BABDC BDCBD
11.I型限制与修饰系统的酶分子是（B）
A.内切酶与甲基化酶分子在一起 B.三亚基双功能酶
C .二亚基双功能酶 D.四亚基双功能酶
12.限制性内切酶的命名遵循的一定原则（D）
A．种名 B. 菌株号C . 属名 D.种名，菌株号或生物型
13.大肠杆菌DNA聚合酶I 型5’ →3’外切核酸酶活性的反应底物是（C）
A.单链DNA及引物B.5’突出的双链DNA
C.双链DNA或DNA:RNA杂交体 D.带3’—OH的双链DNA或单链DNA
14．提高酶连接效率的方法（C）
A.加大酶量20倍B.降低温度
C.加大平头末端的底物浓度D.降低平头末端的底物浓度
15.碱性磷酸酶CIAP指（D）
A.细菌和虾的细菌碱性磷酸酶B.虾碱性磷酸酶
C.细菌碱性磷酸酶 D.牛小肠碱性磷酸酶
16.为了突出3’末端可采用的方法（A）
A．T4—DNAPOL切平，然后平头连接 B.Klenow补平，然后平头连接
C．S1核酸酶切平，然后平头连接 D.Klenow补平，或S1核酸酶切平
17.能使X—gal变蓝的条件是（C）
A.有α—片段 B. α—受体片段
C.同时具有α—片段和α—受体片段D.同时具有β—片段和β受体片段
18.当基因组DNA长度为野生型入噬菌体基因组多少时，不会明显影响存活能力（C）
A.78％~90％ B.60％~78％ C.78％~105％ D.105％以上
19质粒PSC101带有何种抗性基因（B）
A.卡那霉素抗性基因B.四环素抗性基因 C.青霉素抗性基因D.链霉素抗性基因
20.宿主为rec，可在噬菌体溶源性细菌中鉴别重组合非重组入噬菌体的条件为（C）
A.red game 基因存在 B.red game 基因缺失，无chi位点
C.red game 基因缺失或替换，且有chi位点D.red game基因存在且无chi位点
+
三、判断
1.酶切反应的反应温度大多数为37℃对
2.T4DNA连接酶只连接双链DNA分子，不需要ATP。错
3.同一质粒尽管分子量不同，不同的构型电泳迁移率不同，其中ocDNA最快，scDNA最慢。错
4．酵母DNA的原生质体转化法操作简便，容易掌握，但转化率不稳定，成本较高。错
5.同尾酶的黏性末端互相结合后形成的新位点，一般不能再被原来的酶识别。对
6.在蓝白斑筛选中，只有同时存在α—片段和α—受体片段才能使X—gal变蓝。对
7.基因组大小分左臂，中段，右臂三部分。 对
8.cI基因的表达抑制λ噬菌体进入溶源状态。 错
9.chi位点是一段与重组事件相关联的10bpDNA序列，它激活以rec为媒介的交换反应。错10.RNA的琼脂糖凝胶电泳实验中，RNA分析是在变性的条件下进行的，常用的变性剂为乙醛。错
四、简答
一 简述载体应具备的特征 P39
1在宿主细胞内必须能够自主复制（具备复制原点）；
2必须具备合适的酶切位点，供外源DNA片段插入，同时不影响其复制；
3有一定的选择标记，用于筛选；
4最好有较高的拷贝数，便于载体的制备。
二 简述构建质粒载体的基本策略和构建过程 P43
（一）基本策略
1能在受体细胞内有效的复制；
2必须含有允许外源DNA片段克隆的位点，切尽可能的多；
3含有供选择克隆子的标记基因；
4载体DNA分子尽可能小。
（二） 构建过程
1选择合适的出发质粒（亲本质粒）；
2正确获得构建质粒克隆载体的元件；
3选择合适的选择标记基因；
4在能达到预期目的的前提下，过程力求简单。
三 大肠杆菌表达载体的表达形式和优缺点P87
1包涵体蛋白，没有生物学活性、易于分离纯化、不会被细胞内蛋白的降解作用、不会伤害宿主细胞；
2融合蛋白，稳定性大大增加、较高效率、易于分离纯化、一般受体蛋白位于N端外源蛋白位于表面；
3分泌型外源蛋白，更易于分离纯化、需在N端加入信号肽序列、减少外源蛋白在细胞内被蛋白酶降解的概率。
四 简述能够发展成基因表达系统的宿主应具备的条件 P279
1安全无毒，不致病；
2遗传背景清楚，容易进行遗传操作；
3构建的载体DNA容易进入，转化频率较高；
4发酵周期短，培养条件简单，容易进行高密度发酵；
5蛋白质分泌能力良好；
6有类似高等真核生物的蛋白质翻译后的修饰功能。
五 酵母基因工程的优点（至少5点）P275
1酵母是真核生物，大多具有较高的安全性，如酿酒酵母可作为单细胞蛋白直接添加于饲料中;
2酵母繁殖速度快，能够向细菌一样在廉价的培养基上高密度培养，因此能大规模生产，具有降低基因工程产品成本的潜力；
3将原核生物中已知的分子和基因操作技术与真核生物中复杂的转译后修饰能力相结合，能方便的用于外源基因的操作；
4作为真核生物，提供了翻译后加工和分泌的环境，使得产物与天然蛋白一样或类似；
5不会形成不溶性的重组蛋白包涵体易于进行分离提纯。
五、论述
裂解提取法大肠杆菌质粒DNA的过程和几种纯化质粒的方法 P101
过程：
1用溶液Ⅰ将细胞悬浮50mmol/L的葡萄糖具有维持渗透压的作用，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管底；
2加入2倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅱ，该溶液含有NaOH /SDS，能够使细胞迅速破裂溶解，使悬浮液变成完全完全澄清的液体。PH12.0到12.5染色体DNA和蛋白质变性，溶液中形成的大型复合物被SDS包被；
3加入1.5倍于溶液Ⅰ体积的溶液Ⅲ，溶液含有醋酸钾缓冲液，中和NaOH，防止长时间碱性条件会打断DNA，使复合物PDS从溶液中沉淀下来。
4取上清液离心制取粗产品(质粒DNA),再用2倍体积的乙醇沉淀，获得质粒DNA样品（可用RNase A去除RNA，用苯酚/氯仿抽离蛋白）。
方法：
1、PEG纯化质粒
2、氯化铯----溴化乙锭梯度平衡
篇三：基因工程测试题汇总
试卷一是老师给的，答案仅供参考，其他试卷网上搜得！
基因工程练习题
一、 选择题(单选或多选)
2． 第一个作为重组DNA载体的质粒是( C )
(a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8
3． 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( B )不太恰当。
(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成
(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶
(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
(d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
4．Ⅱ型限制性内切核酸酶： ( B )
(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列
(b)仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列 (d)有外切核酸酶和甲基化酶活性
(e)仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供
5．下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?(D E )
(a)限制酶是外切酶而不是内切酶
(b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割
(c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的
(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端
(e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端
6．第一个被分离的Ⅱ类酶是： ( C )
(a)EcoK (b)HindⅢ (c)HindⅡ (d)EcoB
7．在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制那一项最好?( B )
(a)反应时间 (b)酶量 (c)反应体积 (d)酶反应的温度
10．限制性内切核酸酶可以特异性地识别： ( B )
(a)双链DNA的特定碱基对 (b)双链DNA的特定碱基序列
(c)特定的三联密码 (d)以上都正确
11．下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中，正确一项的是( A )。
(a)Sau3A I (b)E．coRI (c)hind III (d)Sau 3A1
12．限制性内切核酸酶的星号活性是指：( A )
(a)在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。 (b)活性大大提高
(c)切割速度大大加快 (d)识别序列与原来的完全不同
13．下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?(D )
(a)甘油含量过高 (b)反应体系中含有有机溶剂
(c)含有非Mg2+的二价阳离子 (d)酶切反应时酶浓度过低
14．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( B )不太恰当
(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成
(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶
(c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
(d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
15．在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用( D )
(a)T4DNA聚合酶 (b)Klenow酶．
(c)大肠杆菌DNA聚合酶I (d)T7DNA聚合酶
17．在基因工程中，可用碱性磷酸酶( A B )
(a)防止DNA的自身环化 (b)同多核苷酸激酶一起进行DNA的5，末端标记
(c)制备突出的3，末端 (d)上述说法都正确
19． 下列哪一种酶作用时需要引物? ( C )
(a)限制酶 (b)末端转移酶 (c)反转录酶 (d)DNA连接酶
20．S1核酸酶的功能是( B C )
(a)切割双链的DNA(b)切割单链的RNA (c)切割发夹环(d)以上有两项是正确的
21．Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了( C)的活性。
(a)5，--3，合成酶， (b)3，--5，外切酶 (c)5，---3，外切酶 (d)转移酶
24． 下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?( C)
(a)质粒 (b)黏粒 (c)酵母人工染色体(YAC) (d) ?噬菌体(e) cDNA表达载体
27．同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：( B )
(a)OCDNA>SCDNA>LDNA (b)SCDNA>LDNA>OCDNA
(c)LDNA>OCDNA>SCDNA (d)SCDNA>OCDNA>LDNA
28．pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自： ( C )
(a)ColEl (b)Ri质粒 (c)pSCl01 (d)pUCl8
29．关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确?( B )
(a)在不同的宿主中具有不同的复制机制
(b)在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点
(c)在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶
(d)在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率
32. Ti质粒：( C D E )
(a)可从农杆菌转到植物细胞中 (b)作为双链DNA被转移
(c)在植物中导致肿瘤 (d)介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素
(e)需要细菌的vir基因帮助转移 (f)在植物细胞中作为染色体外质粒
33．黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体，( A B C )
(a)它具有COS位点，因而可进行体外包装 (b)它具有质粒DNA的复制特性
(c)进入受体细胞后，可引起裂解反应 (d)进入受体细胞后，可引起溶源化反应
34．有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法
的基本原理／优点是：( B )
(a)碱基与特殊染料间不同的相互作用
(b)一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止
(c)限制性位点与DNA末端标记的相关性
(d)可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序
(e)反应是DNA特异的，RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤，也节约了开支。
35．关于cDNA的最正确的说法是：(C)
(a)同mRNA互补的单链DNA (b)同mRNA互补的双链DNA
(c)以mRNA为模板合成的双链DNA (d)以上都正确
36．用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：( )
(a)染色体DNA断成了碎片 (b)染色体DNA分子量大，而不能释放
(c)染色体变性后来不及复性 (d)染色体未同蛋白质分开而沉淀
37. 关于碱解法分离质粒DNA，下面哪一种说法不正确?( )
(a)溶液I的作用是悬浮菌体 (b)溶液Ⅱ的作用是使DNA变性
(c)溶液Ⅲ的作用是使DNA复性
(d)质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性
38. Clark做了一个有趣的实验，发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在双链DNA的
末端加一个碱基，主要是加( ) ．
(a)dGTP (b)dATP (c)dCTP (d)dTTP
39．根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、cDNA文库等。在下列文库中，
( )属cDNA文库
(a) YAC文库 (b) MAC文库 (c) 扣减文库 (d) BAC文库
40．下面关于多克隆位点(multiple clone site,MCS)的描述，不正确的—句是( )
(a)仅位于质粒载体中 (b)具有多种酶的识别序列
(c)不同酶的识别序列可以有重叠 (d)一般是人工合成后添加到载体中
41．在cDNA技术中，所形成的发夹环可用( )
(a)限制性内切核酸酶切除 (b)用3’外切核酸酶切除
(c)用S1核酸酶切除 (d)用5’外切核酸酶切除
42．在DNA的酶切反应系统中，通常：( )
(a)用SS
C缓冲液 (b)加入Mg2+作辅助因子
(c)加入BSA等保护剂 (d)上述说法中，有两项是正确的
43． 黏性末端连接法，不仅操作方便，而且( )
(a)产生新切点 (b)易于回收外源片段 (c)载体不易环化 (d)影响外源基因的表达
45．关于DNA接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确?( )
(a)给外源DNA添加适当的切点 (b)人工构建载体
(c)调整外源基因的可读框 (d)增加调控元件
46．cDNA文库包括该种生物的( )
(a)某些蛋白质的结构基因 (b)所有蛋白质的结构基因
(c)所有结构基因 (d)内含子和调控区
47．下列关于建立cDNA文库的叙述中，哪一项是错误的?( )
(a)从特定组织或细胞中提取DNA或RNA
(b)用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA
(c)以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA
(d)新合成的双链DNA甲基化
48．下列对黏性末端连接法的评价中，哪一项是不正确的? ( )
(a)操作方便 (b)易于回收片段
(c)易于定向重组 (d)载体易于自身环化，降低重组率
49．关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确?( )
(a) 具有可诱导性 (b)具有可转移性
(c)细菌生长的任何时期都可以出现 (d)不同细菌出现感受态的比例是不同的
51．Southem印迹的DNA探针( )杂交。
(a)只与完全相同的片段(b)可与任何含有相同序列的DNA片段
(c)可与任何含有互补序列的DNA片段’．
(d)可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段(e)以上都是
52． 用下列方法进行重组体的筛选，只有( )一定说明外源基因进行了表达。
(a)Southem印迹杂交 (b)Northem印迹杂交
(c)Western印迹(d)原位菌落杂交
53．下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?( )
(a)用限制酶消化DNA(a)DNA与载体的连接
(c)用凝胶电泳分离DNA片段(d)DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
(e)用一个标记的探针与膜杂交
54． 报告基因( )
(a)以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列
(b)以其易于分析的启动子区代替感兴趣基因的启动子区
(c)能用于检测启动子的活性(d)能用于确定启动子何时何处有活性
56. 切口移位是指在( )作用下，使( )带上放射性标记。
(a)DNA聚合酶I，RNA (b)DNA聚合酶I，DNA
(c)DNA聚合酶Ⅲ，RNA (d)DNA聚合酶Ⅲ，DNA
57．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性标记的( )
(a)DNA (b)RNA (c)抗体 (d)抗原
59．用免疫化学法筛选重组体的原理是( )
(a)根据外源基因的表达 (b)根据载体基因的表达
(c)根据mRNA同DNA的杂交 (d)根据DNA同DNA的杂交
60．在切口移位标记DNA探针时只能使用( )
(a)Klenow酶 (b)DNA聚合酶I(c)DNA聚合酶Ⅱ (d)DNA聚合酶Ⅲ
二、 问答题：
说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影向?
在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：
GAATCG，AAATTT， GATATC， ACGGCA? 为什么?
5. 当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时，若要进行双酶切，应采取什么措施?为什么?
6. 什么叫穿梭载体？
7. 怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoR I限制位点中去?
8. 切口移位(nick translation)标记探针的主要步骤有哪些?
9. 什么是Western印迹?它与Southern印迹有什么不同?
10．在基因工程中，为了在细菌细胞中表达真核生物的基因产物，为什么通常要用cDNA而不用基因组DNA?为什么要在cDNA前加上细菌的启动子?
11. 你在做Southern印迹分析，将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。试分析原因。
12．Mn2+、Mg2+对Dnase I(deoxyribonuclease ?)的活性有什么影响?Dnase I在基因工程中有什么作用?
13．某一质粒载体具有Tetr和Ka的表型，在Kan抗性基因内有一Bgl I的切点。现用Bgl I切割该载体进行基因克隆，问：(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?
14．什么是原位菌落杂交(colony hybridization)?
15．Northern印迹与Southern印迹有什么不同?
16．为了大量获得许多用于生化鉴定的产物，你想将拟南芥中的一个序列已知、编码单体酶蛋白的基因在单细胞微生物中表达，你如何确保最终能得到产物?
17．说明Sanger DNA测序法的原理。
18．为什么反转录酶在聚合反应中会出错?
19. YAC载体具有什么样的功能性DNA序列?为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性?
20．假定你分离到一个E．coli的Thy- 突变体，并推测有可能是ThyA基因突变。请设计一个方案用PCR从染色体DNA扩增突变的ThyA基因，测定突变的序列。(注：E．coli野生型的ThyA基因的序列是已知的)
21．用一限制性内切核酸酶切割Lac+ Tet+的质粒载体，已知该酶识别的是4个碱基序列，并产生有两个碱基突出的单链末端，该酶在lac基因内有切割位点，并在第二个氨基酸密码子内，该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后，用DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端，然后重新连接成环，转化Lac- Tets受体菌，筛选Tetr转化子，问：Lac的基因型是什么?并说明原因。
22．什么是随机引物(random primer)?如何标记DNA?
23．列举质粒载体必须具备的4个基本特性。
24．酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构?
25．欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题?
26．用EcoRI和Hind Ⅲ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。
27．什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?
31． 什么是同聚物加尾连接法(homopolymer tails joining)?用何种方法加尾?具有哪些优缺点?
篇四：基因工程测试题及答案
基因工程测练题
1、将人的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中，可使烟草获得抗病毒的能力，形成转基因产品。试分析回答：
(1) 人的基因工程之所以能接到植物体中去，原因是：。
(4)不同生物间基因移植成功，说明生物共有一套有 。
(3) 烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生：
(4) 烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达功能。这说
明 。
(5) 有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，有如船能载舟也能覆舟，甚至可能带来灾难性的
后果，你是否支持这一观点？如果支持，请你举出一个可能出现的灾难性后果的实例： 。
2、1990年对一位缺乏腺苷脱氨酶基因，而患先天性体液兔疫缺陷病的美国女孩进行基因治疗，其方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用逆转录病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。
（1）在基因治疗过程中，逆转录病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中
的，目的基因的受体细胞是。
（2）将转基因白细胞多次回输到患者体内后，兔疫能力趋于正常是由于产生了 ，产生这种物质的两个基本步骤是 、。
3、在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。
（1）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过 而黏合。
（2）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草
剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的 ，原因 。
（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污
染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是:
。
1
4．下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
大量的A
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ ，为什么？。
（2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和 。
（4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要
提供胸腺嘧啶个。
（5）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产
生 ，再加入 ，才可形成C。
（6）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
5．近些年来，棉铃虫在我国大面积爆发成灾，造成巨大的经济损失；随之而来，化学农药的产量和种类也在逐年增加，但害虫的抗药性也在不断增强。针对这种情况，我国科学家采用基因工程技术，开展了“转基因抗虫棉”的研究，成功地将细菌的毒蛋白基因导入到棉花细胞中，从而使棉花植株的细胞内能合成这种毒蛋白。以后棉铃虫再啃食这种棉花时，就会摄入毒蛋白，虽吃得很饱，但不能消化，最后只能慢慢饿死。这就是转基因抗虫棉不易受到害虫侵害的原因。据以上材料，分析回答下列问题：
?细菌的基因之所以能嫁接到棉花体内，原因是___________________________。
?科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于____________________________。
?在此过程中所用的质粒载体通常来自于下列哪种微生物（ ）
A.土壤农杆菌 B.大肠杆菌 C.枯草杆菌 D.放线菌
? 某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒的芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤骚痒难忍症状，一段时间后这些症状又自然消失，该现象可能是___________
? 利用基因工程技术培育抗虫棉，相比传统的杂交育种方法，其优点主要表现为
__________________________________________________________________________
2
6.科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的
DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中
得以表达。过程如右图据图回答：
(1)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分
子进行重组，原因是。
(2)过程①表示的是采取 的方法来获取目的基因。
(3)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组
质粒，可采用的方法是 ， 理由是： 。
(4)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生
7.根据实验原理和材料用具，设计实验选择运载体质粒，明确质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素类别。
①实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可用作运载体。
②材料用具：青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。
③方法步骤：⑤⑥
第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标为1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注
入1mL蒸馏水、青霉素液、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。
第二步：将接种环在酒精灯上灼烧，并在酒精灯火旁取菌种，对三个培养皿分别接种。 第三步：将接种后的三个培养皿放入37℃恒温箱培养24h。
3 的现象是 ，原因是：
④预期结果：
_____________________________________________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
8、限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。
（1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
（2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
（3）在DNA连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？为什么？
↓↓4
基因工程测练题答案
1、（1）人与植物结构组成相同。 （2）遗传密码，共同的原始祖先。
（3）抗病毒干扰素。（4）基因是遗传物质结构和功能的基本单位。
（5）用于改良作物的抗不良环境的基因引入杂草，就将难以控制杂草。
2、 （１）载体 正常腺苷脱氧酶基因 白细胞
（２）腺苷脱氧酶（抗体）转录 翻译
3.（1）限制性内切酶，碱基互补配对 （2）3/4，雌雄配子各有1/2含抗除草剂基因；受精时，雌雄配子随机结合 （3）叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递而在下一代中显现出来
4．（1）不能，皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素
（2）逆转录 ，解旋。 （3）内含子。 （4）15（a－b）。
（5）同一种限制性内切酶 ， 相同的黏性末端， DNA连接酶。（6）CaCl
5. ? ①组成细菌和植物的DNA分子的空间结构和化学组成相同
②有互补的碱基序列(2分)? 基因突变(1分) ?A (1分)
? 过敏反应(1分) ? 能根据人类的需要，定向改造遗传物质，获得优良遗传性状(转 载 于:wWw.cssYQ.COm 书 业 网:基因工程试卷)6（1） 人的基因与大肠杆菌DNA的组成成分相同，结构相同 (2) 反转录法(逆转录法
(3)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，
A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因
(4)有的能生长，有的不能生长导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒
性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能。
7 ①1号培养皿细菌正常生长；
②2、3号培养皿中，仅2中细菌能存活，说明细菌有青霉素抗性基因，而没有四环素抗性基因。③2、3号培养皿中，仅3中细菌能存活，说明细菌有四环素抗性基因，而没有青霉素抗性基因。④2、3号培养皿中都有存活，说明该菌质粒上有两种抗菌素的抗性基因。
⑤2、3号培养皿中都不存活，说明该菌质粒上没有这两种抗菌素的抗性基因。
8、（1）
—G↓GATC C— 用酶Ⅰ切割 —GGATCC—
—C CTAG↑G— —CCTAGG
—
（2）
—↓GATC 目的基因—??— ↓GATC — 用酶Ⅱ切割 —GATC—??—目的基因
— CTAG↑—??— CTAG↑— —CTAG —??—CTAG
（3）可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互补的） mRNA 。 2 。 (1分) ) A上有四环素抗GATC—— 5 说明已导入了质粒